Die Hauptunterschied zwischen Durchflusszytometrie und FACS ist das Die Durchflusszytometrie ermöglicht die schnelle, genaue und einfache Erfassung von Daten in Bezug auf viele Parameter aus einem heterogenen Flüssigkeitsgemisch, das lebende Zellen enthält. Aber FACS (Fluoreszenz-aktivierte Zellsortierung) ist ein Derivat der Durchflusszytometrie, das es ermöglicht, ein heterogenes Zellgemisch physikalisch in verschiedene Populationen zu sortieren. Darüber hinaus nutzt die Durchflusszytometrie die unterschiedlichen Lichtstreueigenschaften von Zellen, um Daten zu sammeln, während FACS hochspezifische Antikörper verwendet, die mit Fluoreszenzfarbstoffen markiert sind, um zwischen Zelltypen zu unterscheiden. Darüber hinaus verwendet die Durchflusszytometrie einen Sensor, um Daten zu erfassen, während FACS einen Elektromagneten verwendet, um die Probe zu sortieren.

Kurz gesagt, Durchflusszytometrie und FACS sind zwei Techniken in der analytischen Zellbiologie, die verwendet werden, um Zellen in einem heterogenen Gemisch zu profilieren. Im Allgemeinen beinhaltet die Durchflusszytometrie die Zellanalyse und die Messung der Proteinexpression als eine weitere Analysetechnik von FACS, die das Aussortieren von Zellen in einer gemischten Population beinhaltet.

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Was ist Durchflusszytometrie?

Die Durchflusszytometrie ist eine analytische zellbiologische Technik, die es erlaubt, verschiedene Parameter von lebenden Zellen in einem heterogenen Gemisch zu bestimmen. Außerdem wurde 1953 das erste impedanzbasierte Durchflusszytometriegerät von Wallace H. Coulter erfunden.

Verfahren

Darüber hinaus ermöglicht die Suspension der Probe mit mehreren Zelltypen in Flüssigkeit das Durchfließen des Durchflusszytometers. Darin fließen Zellen idealerweise zellweise durch einen Laserstrahl. Hier zeigen Zelltypen unterschiedliche Lichtstreuungseigenschaften, die für Zelltypen einzigartig sind. Dies kann typischerweise auf die unterschiedliche Expression von Proteinen, Nukleinsäuregehalt, intrazellulären Komponenten oder Zelloberflächenkomponenten zurückzuführen sein.

Abbildung 1: Durchflusszytometrie

Analyse

Außerdem sind in der Durchflusszytometrie verschiedene Arten von Lichtstreuungsmustern und Fluoreszenzemissionsmustern bei der Analyse von Zelltypen beteiligt. Sie umfassen vorwärts gestreutes und seitlich gestreutes Licht, Fluoreszenzemission und multiparametrische Analyse. Von diesen wird vorwärts gestreutes Licht von der Zelle gebrochen und setzt sich entlang des gleichen Weges fort, den es ursprünglich durchquert hat. Außerdem hilft es, die Größe der Zelle zu erkennen. Währenddessen wird seitlich gestreutes Licht von den Zellen in eine Richtung gebrochen, die außerhalb des ursprünglichen Lichtwegs liegt. Somit bestimmt es die Granularität und Komplexität verschiedener Zelltypen.

Darüber hinaus emittieren fluoreszierende Moleküle von Zellen nach Anregung durch die kompatible Wellenlänge des Lasers fluoreszierendes Licht, was die Identifizierung unterschiedlicher Strukturen der Zellen unterstützt. Darüber hinaus können auch Fluoreszenzfarbstoffe oder fluoreszenzmarkierte Antikörper verwendet werden, um spezifische Strukturen der Zellen zu markieren. Abgesehen davon wird von den Leukozytenpopulationen vorwärts vs. seitlich gestreutes Licht aufgetragen, was die spezifische Identifizierung von Granulozyten und Lymphozyten unterstützt.

Was ist FACS

FACS (Fluoreszenz-aktivierte Zellsortierung) ist eine modifizierte Form der Durchflusszytometrie. Das Hauptmerkmal von FACS ist seine Fähigkeit, jeden Zelltyp in der heterogenen Mischung physikalisch zu trennen. Dazu verwendet diese Technik fluoreszenzmarkierte, zielspezifische Antikörper, um einen bestimmten Zelltyp in der Mischung zu identifizieren. Daher trennt FACS das heterogene Zellgemisch in zwei weitere Zelltypen. Außerdem wurde FACS zuerst von Len Herzenberg erfunden, der 2006 für seine wegweisenden Arbeiten den Kyoto-Preis gewann.

Abbildung 2: FACS

Bedeutung

Verfahren

Normalerweise fließt die Probe bei FACS durch eine vibrierende Düse, die den Strom in Tröpfchen zerteilt, die idealerweise eine Zelle enthalten. Anschließend durchlaufen diese Tröpfchen einen elektrischen Ladering, der die Zelltypen physikalisch nach ihrer Ladung sortiert.

Ähnlichkeiten zwischen Durchflusszytometrie und FACS

Unterschied zwischen Durchflusszytometrie und FACS

Definition

Durchflusszytometrie bezieht sich auf die Analyse von biologischem Material durch Nachweis der lichtabsorbierenden oder fluoreszierenden Eigenschaften von Zellen oder subzellulären Fraktionen wie Chromosomen, wenn sie in einem schmalen Strahl durch einen Laserstrahl laufen. Unter FACS (Fluoreszenz-aktivierte Zellsortierung) versteht man eine spezielle Art der Durchflusszytometrie, die ein Verfahren zum Sortieren einer heterogenen Mischung biologischer Zellen in zwei oder mehr Behälter, eine Zelle nach der anderen, basierend auf der spezifischen Lichtstreuung und Fluoreszenz bereitstellt Eigenschaften jeder Zelle.

Korrespondenz

Die Durchflusszytometrie ist eine analytische zellbiologische Technik, während FACS eine spezialisierte Art der Durchflusszytometrie ist.

Folge

Auf FACS folgt die Durchflusszytometrie, während FACS der erste Schritt zur Analyse eines heterogenen Zellgemisches ist.

Bedeutung

Die Durchflusszytometrie beinhaltet die Zellanalyse und die Messung der Proteinexpression als eine weitere Analysetechnik von FACS, während FACS das Aussortieren von Zellen in einer gemischten Population beinhaltet.

Funktion

Die Durchflusszytometrie misst die Eigenschaften von Zellen wie Anzahl, Größe und Nukleinsäuregehalt von Zellen, während FACS Zellen in Subpopulationen aus einem heterogenen Gemisch trennt.

Probenahmeverfahren

Die Durchflusszytometrie nutzt die unterschiedlichen Lichtstreueigenschaften von Zellen, um Daten zu sammeln, aber FACS verwendet hochspezifische Antikörper, die mit Fluoreszenzfarbstoffen markiert sind, um zwischen Zelltypen zu unterscheiden.

Analyse Methode

Die Durchflusszytometrie verwendet einen Sensor, um Daten zu erfassen, aber FACS verwendet einen Elektromagneten, um die Probe zu sortieren.

Abschluss

Zusammenfassend ist die Durchflusszytometrie eine analytische zellbiologische Technik, um die Eigenschaften von Zellen in einem heterogenen Gemisch zu bestimmen. Somit hilft es, die Anzahl der Zellen, die Größe und den Nukleinsäuregehalt der Zellen usw. zu bestimmen. Außerdem werden unterschiedliche Lichtstreuungseigenschaften von Zellen verwendet, die für jeden Zelltyp in der Mischung einzigartig sind. Andererseits ist FACS eine Art der Durchflusszytometrie, die das Aussortieren von Zellen im heterogenen Gemisch in zwei oder mehr Typen ermöglicht. Außerdem verwendet es fluoreszenzmarkierte Antikörper, um spezifisch Komponenten verschiedener Zelltypen zu identifizieren. Daher ist FACS die erste analytische Technik, gefolgt von der Durchflusszytometrie in Proteinexpressionsassays. Daher besteht der Hauptunterschied zwischen Durchflusszytometrie und FACS in der Methode der Zelldifferenzierung und -funktion.

Verweise:

1. Robinson, Ryan und Stefan Pellenz. „Ryan Robinson und Stefan Pellenz.“ Antikörper, 6. Dezember 2013, hier verfügbar.2. „Durchflusszytometrie (FCM) /FACS | Fluoreszenzaktivierte Zellsortierung (FACS).“ Sino Biological, Sino Biological Inc., hier erhältlich.

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1. „Cytometer“ von Kierano – Eigene Arbeit (CC BY 3.0) über Commons Wikimedia 2. „Fluorescence Assisted Cell Sorting (FACS) B“ von SariSabban (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia