Die Hauptunterschied zwischen Nitrozellulose und Nylonmembran ist, dass die Nitrozellulosemembran hat eine hohe Affinität zur Proteinbindung, wohingegen die Nylonmembran eine hohe Affinität zur Nukleinsäurebindung aufweist. Darüber hinaus binden hydrophobe und elektrostatische Wechselwirkungen Makromoleküle an die Nitrozellulosemembranen, während ionische, hydrophobe und elektrostatische Wechselwirkungen Makromoleküle an die Nylonmembranen binden

Nitrozellulose und Nylonmembran sind zwei Arten von Membranen, auf die die Makromoleküle aus dem Gel übertragen werden. Nitrozellulosemembranen können jedoch auch verwendet werden, um DNA und RNA zu binden.

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Was ist eine Nitrozellulosemembran?

Die Nitrozellulosemembran ist aufgrund der hohen Proteinbindungsaffinität eine übliche Matrix, die beim Western Blotting verwendet wird. Es kann jedoch verwendet werden, um Nukleinsäuren neben immobilisierten Proteinen und Glykoproteinen nachzuweisen. Die Immobilisierung der Makromoleküle erfolgt hauptsächlich durch hydrophobe Wechselwirkungen. Wasserstoffbrücken werden auch zwischen den Nitrogruppen der Membran und den Aminosäureseitenketten der Proteine ​​gebildet. Die Proteinimmobilisierung wird in den hohen Salz- und niedrigen Methanolkonzentrationen hoch sein.

Abbildung 1: Prinzip von Blot

Nitrozellulose-Membranen sind in 100% reiner Nitrozelluloseform mit einer hohen, einheitlichen Oberfläche erhältlich. Die verfügbaren Vorgrößen sind 0,2 µm und 0,45 µm. Die kleine Porengröße ist besser für die Bindung mit kleinen Proteinen (<14 kDa). Die Bindungs- und Rückhaltekapazität von Proteinen beträgt 80-250 µg/cm²². Die vorkonfektionierten Membranen sind gebrauchsfertig. Einer der Hauptvorteile von Nitrozellulosemembranen ist ihr sehr geringer Hintergrund, da sie leicht blockiert werden können. Die getragenen Nitrozellulosemembranen können abgezogen und erneut sondiert werden.

Was ist eine Nylonmembran?

Nylonmembran ist eine weit verbreitete Matrix für die Bindung von Nukleinsäuren. Nylonmembranen sind mechanisch stärker als Nitrozellulosemembranen. Die beiden Haupttypen von Nylonmembranen, die beim Blotting verwendet werden, sind Biodyne A und Biodyne B. Die Porengröße beider Typen beträgt 0,45 µm. Sie sind hitze- und lösungsmittelbeständig. Außerdem werden sie nicht schrumpfen, reißen oder reißen. Beide ergeben einen niedrigen Hintergrund als Nitrozellulosemembranen.

Abbildung 2: Southern Blot Membran

Ähnlichkeiten zwischen Nitrozellulose und Nylonmembran

Unterschied zwischen Nitrozellulose und Nylonmembran

Definition

Nitrocellulosemembran bezieht sich auf eine klebrige Membran, die zum Immobilisieren von Nukleinsäuren und Proteinen beim Blotting verwendet wird, während sich Nylonmembran auf einen Membrantyp mit hoher Festigkeit und Hitzebeständigkeit bezieht, der verwendet wird, um Makromoleküle zu immobilisieren.

Besteht aus

Nitrozellulosemembranen bestehen aus nitrierter Zellulose, während Nylonmembranen aus unmodifiziertem oder positiv geladenem Biodyne A- und Biodyne B-Nylon bestehen.

Porengröße

Die Porengrößen von Nitrozellulosemembranen betragen 0,2 µm und 0,45 µm, während die Porengröße der Nylonmembranen 0,45 µm beträgt.

Stärke

Nitrozellulosemembranen sind spröde und daher nicht wiederverwendbar, während Nylonmembranen mechanisch stark sind.

Übertragungsmethode

Der elektrophoretische Transfer wird hauptsächlich beim Transfer von Proteinen auf die Nitrozellulosemembranen verwendet, während der Kapillartransfer bei Nylonmembranen die gängige Praxis ist.

Affinität

Nitrocellulosemembranen haben eine hohe Affinität zu Protein, während Nylonmembranen eine hohe Affinität zu Nukleinsäuren aufweisen. Für Nukleinsäuren können auch Nitrozellulosemembranen verwendet werden.

Blotting

Nitrozellulosemembranen sind besser für Western-Blotting, während Nylonmembranen besser für Southern- und Northern-Blotting sind.

Bindungsinteraktionen

Hydrophobe und elektrostatische Wechselwirkungen binden Makromoleküle an die Nitrozellulosemembranen, während ionische, hydrophobe und elektrostatische Wechselwirkungen Makromoleküle an die Nylonmembranen binden.

Proteinbindungskapazität

Die Proteinbindungskapazität der Nitrozellulosemembran beträgt 80-250 μg/cm²² während die Proteinbindungskapazität der Nylonmembran 150-200 μg/cm² beträgt².

Abschluss

Die Nitrozellulosemembran ist eine spröde Membran, die hauptsächlich zum Immobilisieren von Protein beim Western-Blotting verwendet wird, während die Nylonmembran eine starke Membran ist, die hauptsächlich zum Immobilisieren von Nukleinsäuren verwendet wird. Die Nitrozellulosemembranen binden Moleküle durch hydrophobe Wechselwirkungen, während die Nylonmembranen Moleküle durch elektrostatische Wechselwirkungen binden. Daher ist der Hauptunterschied zwischen Nitrozellulose und Nylonmembran die Affinität.

Referenz:

1. „Nitrocellulosemembranen für Western Blotting | Thermo Fisher Scientific – LK.“ Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, hier erhältlich2. „Biodyne A Nylonmembran, 0,45 m, 8 cm x 12 cm.“ Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, hier erhältlich3. „Biodyne B Nylonmembran, 0,45 m, 8 cm x 12 cm.“ Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, hier erhältlich

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1. „Blot-Biologie“ von Gbdivers – Eigene Arbeit (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia2. „Southern Blot Membran“ Von Bojan Žunar – Eigene Arbeit (CC BY-SA 4.0) über Commons Wikimedia