Die Hauptunterschied zwischen Klonen und Subklonen ist das Klonen ist die Herstellung von Klonen von Organismen oder Kopien von Zellen oder DNA-Fragmenten, während Subklonen eine Technik ist, die verwendet wird, um eine bestimmte DNA-Sequenz von einem Elternvektor in einen Zielvektor zu übertragen. Darüber hinaus verwendet das Klonieren primäre cDNA oder ein Gen, während das Subklonieren die nachfolgende Manipulation des Klons durch Ändern des Vektors oder des primären Inserts beinhaltet.

Klonen und Subklonen sind zwei Techniken in der Molekularbiologie, um das Genom von Organismen durch Einführen von interessierenden DNA-Fragmenten zu manipulieren.

Klonen, Expressionsvektor, Einfügen, Übergeordneter Vektor, Subklonen

Was ist Klonen?

Klonen ist eine Technik in der Molekularbiologie, die hilft, mehrere Moleküle eines interessierenden DNA-Fragments herzustellen. Daher wird es auch als molekulares Klonen bezeichnet. Es kann verwendet werden, um sowohl kodierende als auch nicht-kodierende DNA, wie Gene bzw. regulatorische DNA-Sequenzen, einschließlich Promotoren, zu amplifizieren. Darüber hinaus hat es eine Vielzahl von Anwendungen, vom genetischen Fingerabdruck bis zur Proteinproduktion im großen Maßstab.

Abbildung 1: Molekulares Klonen

Darüber hinaus sind die Schritte beim Klonen wie folgt:

1. Fragmentierung – Aufbrechen eines DNA-Strangs durch Restriktionsverdau
2. Ligation – Zusammenkleben von DNA-Stücken in der gewünschten Reihenfolge
3. Transfektion – Einfügen der neu gebildeten DNA-Stücke in Zellen
4. Screening/Selektion – Auswahl der Zellen, die erfolgreich mit der neuen DNA transfiziert wurden

Klonen bezieht sich jedoch auch auf die Produktion einer großen Anzahl genetisch identischer Individuen aus einem Elternorganismus. Es kann in Form der Fortpflanzung natürlich in der Umwelt vorkommen. Andererseits kann sie im Labor durchgeführt werden, wie es bei Gewebekulturtechniken der Fall ist.

Was ist Subklonen?

Subklonieren ist eine Technik in der Molekularbiologie, die hilft, die Insert-DNA vom Elternplasmid in einen zweiten Vektor zu verschieben. Dabei kann der zweite Vektor ein Expressionsvektor sein, der die Expression des DNA-Fragments ermöglicht. Darüber hinaus kann es verwendet werden, um die Expression unter einem anderen Promotor zu ändern. Oder der zweite Vektor kann spezielle Eigenschaften enthalten, wie einen spezifischen Marker für die Antibiotika-Selektion oder die Fluoreszenzexpression.

Abbildung 2: Subklonen

1. Zuerst das Insert aus dem Elternvektor freisetzen und durch Restriktionsverdau reinigen
2. Ligieren Sie das Insert in einen vorbereiteten Zielvektor
3. Dann wandeln Sie die Ligationsreaktion in kompetente Bakterienzellen um
4. Screenen Sie die transformierten Zellen nach dem Insert

Ähnlichkeiten zwischen Klonen und Subklonen

Unterschied zwischen Klonen und Subklonen

Definition

Klonen bezieht sich auf den Prozess der Erzeugung von Klonen von Organismen oder Kopien von Zellen oder DNA-Fragmenten, während sich Subklonen auf eine Technik bezieht, die verwendet wird, um eine bestimmte DNA-Sequenz von einem Elternvektor zu einem Zielvektor zu bewegen. Dies ist also der Hauptunterschied zwischen Klonen und Subklonen.

Bedeutung

Art von Vektoren

Der Vektortyp ist ein weiterer Unterschied zwischen Klonen und Subklonen. Beim Klonen werden häufig Klonierungsvektoren verwendet, während beim Subklonen Expressionsvektoren verwendet werden können.

Abschluss

Klonen ist eine Technik in der Molekularbiologie, die hilft, ein interessierendes DNA-Fragment in einen Wirtsorganismus einzuführen oder DNA-Bibliotheken zu konstruieren, während das Subklonen eine andere Technik in der Molekularbiologie ist, die hilft, ein DNA-Fragment von einem Elternvektor auch in einen anderen Vektor einzuführen. Daher ist dies der Hauptunterschied zwischen Klonen und Subklonen.

Verweise:

1. „Gemeinsame Klonanwendungen und -strategien“. Thermo Fisher Scientific – USA, hier erhältlich.

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1. „Abbildung 17 01 06“ von CNX OpenStax (CC BY 4.0) über Commons Wikimedia 2. „Schritte des molekularen Klonens“ von Alexpicardal97 – Eigene Arbeit (CC BY-SA 4.0) über Commons Wikimedia